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TRIzol 總RNA抽提試劑 原裝*
TRIzol是一種新型總RNA抽提試劑,可以直接從細胞或組織中提取總RNA。其含有苯酚、異硫氰酸胍等物質,能迅速破碎細胞并抑制細胞釋放出的核酸酶。
TRIzol在破碎和溶解細胞時能保持RNA的完整性,因此對純化DNA及標準化RNA的生產十分有用。 TRIzol的成分 TRIzol的主要成分是苯酚。苯酚的主要作用是裂解細胞,使細胞中的蛋白,核酸物質解聚得到釋放。苯酚雖可有效地變性蛋白質,但不能*抑制RNA酶活性,因此TRIzol中還加入了8-羥基喹啉、異硫氰酸胍、β-巰基乙醇等來抑制內源和外源RNase(RNA酶)。 ※0.1%的8-羥基喹啉可以抑制RNase,與氯仿聯合使用可增強抑制作用。 ※異硫氰酸胍屬于解偶劑,是一類強力的蛋白質變性劑,可溶解蛋白質并使蛋白質二級結構消失,導致細胞結構降解,核蛋白迅速與核酸分離。 ※β-巰基乙醇的主要作用是破壞RNase蛋白質中的二硫鍵。
用勻漿器將組織磨碎,加入TRIzol處理組織。5分鐘后加入氯仿,以每分鐘12000轉離心5分鐘,樣品即分成水樣層、中間層和有機層。 ※RNA存在于水樣層中,收集水樣層后可以通過異丙醇沉淀RNA來還原。 ※在除去水樣層后,有機層中的DNA和蛋白質也能相繼以沉淀的方式還原:乙醇能使中間層的DNA沉淀析出,在有機層中加入異丙醇能沉淀出蛋白質。 每100ml TRIzol可以抽提100個六孔板中的樣品或100個50-80mg的組織樣品。無論樣品是人、動物、植物還是細菌組織,該方法對少量的組織(50-100mg)和細胞(約五百萬個)及大量的組織(≥1g)和細胞(超過一千萬個)均有較好的分離效果。 每一百萬細胞用TRIzol抽提可得5-15微克RNA,每毫克組織用TRIzol抽提可得1-10微克RNA(產量因細胞和組織不同而異)。 TRIzol操作上的簡便性允許其同時處理多個樣品,所有的操作可以在一小時內完成。 TRIzol抽提的總RNA能夠避免DNA和蛋白質的污染,故而能夠作RNA 印跡分析、斑點雜交、poly(A)+ 選擇、體外翻譯、RNA酶保護分析和單分子克?。≒CR)。 ※如果是用于PCR,當兩條引物位于單一外顯子內時,建議用級聯擴大的DNase I(Cat. No. 18068)來處理抽提的總RNA。
※TRIzol試劑能促進不同種屬、不同分子量大小的多種RNA的析出。例如,從大鼠肝臟抽提的RNA經過瓊脂糖凝膠電泳并用溴化乙啶染色,可見許多介于7kb和15kb之間的不連續的高分子量條帶(mRNA和hnRNA成分),兩條優勢核糖體RNA條帶位于~5 kb (28S)和~2 kb (18S),低分子量RNA介于0.1和0.3kb之間 (tRNA, 5S)。當抽提的RNA用TE稀釋時,其A260/A280比值≥1.8。抽提小RNA時宜-70℃沉淀。
公司簡介
上海索萊寶生物科技有限公司是一家集銷售生化試劑、實驗耗材、自產分子生物學產品為一體,并能提供的專業性生物科技公司。公司秉承“以客戶為中心,以產品為保障、以誠信為基礎、以創新為宗旨”的發展理念,在依靠客戶的大力支持和員工的不懈努力下獲得了快速的成長。公司織結構清晰,內部管理科學,擁有一支既分工細致又高度合作的年輕化隊伍,保持了各個部門之間的高效合作運轉,充分保障了公司在充滿競爭的市場中處于地位。公司注重與*合作,目前已與 Amersham、Amresco、Axygen、BD、Corning、Dragon、Eppendorf等企業結成緊密的合作伙伴關系,代理其世界的*產品,并在全國各地設有分銷機構。我們將以高度的責任感和出色的產品質量為客戶提供高品質的產品和實驗技術解決方案。豐富的經驗、優良的品質、充足的庫存、準確的交貨時間、競爭力的價格,所有這些都保證了我們向您提供的是專業的服務!立足北京,上海,*,隨著產品營銷戰略的不斷延伸,我們將逐步發展成為*的專業性生物科技公司。我們希望能夠和尊敬的客戶一起,利用各自的資源優勢和勇于進取的敬業精神,為中國生命科學研究的發展作出更多的貢獻。為了更好、更全面的發展,現公司正在誠招各地代商和招聘若干銷售、研發人員,歡迎垂詢并期待您的加入!
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